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肌組織細胞培養(yǎng)

 

各種肌組織均可用于培養(yǎng),以心肌和骨骼肌較實用。

(-)骨骼肌細胞培養(yǎng)

1、出生12天的乳鼠,引頸處死。
2
、無菌取大腿肌組織,切成0.30.5cm2小塊后,用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網(wǎng)或紗布濾過。
3
、計數(shù)調(diào)整細胞密度。
4
、快接種量2×106/皿入培養(yǎng)基培養(yǎng)。
5
、培養(yǎng)基內(nèi)含10%小牛血清,可加1%的胎汁以促進分化。

接種在膠原或膠原的底物上能促進細胞分化,明膠配置:用Hanks液配成0.01%明膠。

該細胞接種率約50%,細胞生長開始呈紡錘形,培養(yǎng)5052小時后出現(xiàn)融合形成肌細胞狀多核纖維。數(shù)日后融合停止,此時可觀察到橫紋,一般在融合后二、三天內(nèi)能見到收縮現(xiàn)象。

(二)心肌細胞培養(yǎng)

心肌細胞是最早的培養(yǎng)材料,Carrel曾長期培養(yǎng)過心肌組織,至今心肌仍不失為好的培養(yǎng)物,最常用的是雞胚心肌。

    心肌比較容易培養(yǎng)和生長,可用懸滴培養(yǎng)、組織塊培養(yǎng)和消化培養(yǎng)法,均可獲良好的效果。取心室肌培養(yǎng)較好,原代培養(yǎng)的雞胚心肌呈紡錘形,培養(yǎng)成功時,一周后可見節(jié)律性收縮現(xiàn)象。

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